固氮粪产碱菌谷氨酰胺合成酶的分离纯化及其特性

文献类型： 中文期刊

第一作者： 尤崇杓

作者： 尤崇杓;张良才;宋未

作者机构：

关键词： 谷氨酰胺合成酶，粪产碱菌，纯化，特性

期刊名称： 生物化学杂志

ISSN： 10077626

年卷期： 1994 年 02 期

页码：

收录情况： 北大核心

摘要： 联合固氮细菌粪产碱菌（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｆａｅｃａｌｉｓ）Ａ１５０１菌体经超声破碎后，无细胞粗提液以ＰＥＧ－６０００分级沉淀，丙酮沉淀，再经蓝琼脂糖（ＢｌｕｅＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６８）亲和层析分离、纯化。获得的纯谷氨酰胺合成酶（ＧＳ）在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和４－３０％梯度ＰＡＧＥ上均呈均一的一条带。ＧＳ亚基及整酶分子量分别为５５ｋＤ和６４５ｋＤ，亚基由４５６个氨基酸残基组成。ＧＳ的Ｋｍ值，在以Ｇｌｕ为氮源的介质中培养时分别为２０ｍｍｏｌ／Ｌ（Ｇｌｕ），５０ｍｍｏｌ／Ｌ（ＡＴＰ）和４５ｍｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ~＋_４）；在以ＮＨ~＋_４为氮源的介质中培养时则分别为７０ｍｍｏｌ／Ｌ（Ｇｌｕ），４９ｍｍｏｌ／Ｌ（ＡＴＰ）和８０ｍｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ~＋_４），表明ＮＨ~＋_４培养下形成高度腺苷化的ＧＳ对Ｇｌｕ及ＮＨ~＋_４的亲和力有所下降。

分类号： Q939.113

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