PRRSV-N蛋白单抗制备与直接免疫荧光方法建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 何民辉

作者： 何民辉;李真光;王凤雪;宋妮;朱洪伟;刘杏;温永俊;武华

作者机构：

关键词： PRRSV;单抗;亲和力;直接免疫荧光;特异性;细胞病变

期刊名称： 基因组学与应用生物学

ISSN： 1674-568X

年卷期： 2017 年 12 期

页码： 5077-5083

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了建立一种快速的PRRSV诊断方法,本研究以纯化的PRRSV-TJ-PGEX-6P-N重组蛋白处理抗原免疫BALB/C小鼠,利用淋巴瘤细胞融合技术,包被带有His标签的PRRSV-N蛋白,通过间接ELISA方法筛选到两株可以稳定分泌的N蛋白特异性单克隆抗体,命名为N-13、N-29。通过间接ELISA方法,WB与IFA方法对其进行鉴定,并测定其亲和常数。腹水效价分别为1:4 000与1:5 000,选择腹水效价高的N-13进行纯化标记,并对标记抗体的特异性、敏感性与保存期进行鉴定;通过DFA条件的摸索,建立了一种敏感的DFA诊断方法,并对其和PRRSV分离鉴定常用的CPE观察法进行比较。结果表明该DFA方法结果准确,可以作为实验室病毒分离鉴定和猪生产中该疾病诊断的有效手段。

分类号： S852.4

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