猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒三型、猪流感病毒三重RT-PCR检测方法建立及初步应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王梦杰

作者： 王梦杰;张文立;王欣荣;陈见兴;夏长友;陈洪岩;张贺;王玉娥

作者机构：

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;猪圆环病毒三型;猪流感病毒;三重RT-PCR

期刊名称： 微生物学通报

ISSN： 0253-2654

年卷期： 2022 年 012 期

页码： 5092-5099

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【背景】猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）、猪圆环病毒三型（porcine circovirus type Ⅲ,PCV3）和猪流感病毒（swine influenza virus,SIV）是3种影响猪只健康的重要呼吸道病原，对养猪业造成严重的经济损失，因此需要建立高效快速的检测方法，以了解3种病原在国内的流行情况。【目的】建立能同时检测PRRSV、PCV3和SIV的三重RT-PCR方法，为3种病毒的流行病学调查和疾病监控提供技术支持。【方法】针对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV），猪圆环病毒三型（PCV3），猪流感病毒（SIV）基因序列，分别设计3对特异性引物，扩增PRRSV M和N基因（436 bp）、PCV3 Cap基因（619 bp）和SIV M基因（199 bp）。通过对退火温度和引物浓度优化建立三重RT-PCR检测方法，并对建立的多重检测方法进行特异性、敏感性、重复性试验验证。【结果】建立了能够同时快速检测PRRSV、PCV3、SIV的三重RT-PCR方法，而对猪瘟病毒（classical swine fever virus,CSFV）、猪伪狂犬病病毒（pseudorabies virus,PRV）、猪圆环病毒2型（porcine circovirus type Ⅱ,PCV2）、猪细小病毒2型（porcine parvovirus Ⅱ,PPV2）、猪细小病毒3型（porcine parvovirus Ⅲ,PPV3）和猪细环病毒1型（torque teno sus virus I,TTSuV1）等6种病原的扩增均为阴性，特异性较好。敏感性结果显示，同时检测PRRSV、PCV3、SIV这3种病原的检测下限为100copies/μL，批间与批内试验结果均一致。用该方法对黑龙江省部分地区猪场的67份临床病料进行检测，结果显示PRRSV阳性率为16.5%,PCV3阳性率为10.5%,SIV阳性率为10.5%，而且存在混合感染。【结论】该方法灵敏度高、特异性强，能够应用于临床样品检测，有效预测病原的流行情况。

分类号： S858.28

  • 相关文献

[1]PCV2相关性肺炎与猪圆环病毒Ⅱ型感染相关的猪呼吸道疾病综合征(PRDC). 崔尚金,戚亭,岳峰雄,周盛华. 2007

[2]复合RT-PCR检测猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟及猪流感等3种病毒方法的建立. 夏俊,石进纯,成进,张美玲,陆桂丽,汪萍. 2013

[3]牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒与牛冠状病毒三重RT-PCR方法的建立与应用. 余波,姜玲玲,李婷,周景瑞,许浩翔,冉江,罗文菊,刘镜. 2023

[4]牛诺如病毒和牛嵴病毒及牛环曲病毒三重RT-PCR检测方法的建立. 孙睿雪,李玉铎,吴国军,陈天杰,车瑞香,茹毅,韩欢胜,赵建军. 2024

[5]应用三重RT-PCR技术检测三种马铃薯病毒. 张威,白艳菊,范国权,高艳玲,申宇,张抒,孟宪欣. 2015

[6]PDCoV、SADS-CoV与SVA三重RT-PCR检测方法的建立与应用. 陈见兴,王豪杰,潘喻,刘弘毅,林欢,朱良全,陈洪岩,谢金鑫,夏长友,张贺,王玉娥. 2022

[7]H5、H7、H9亚型禽流感病毒三重RT-PCR检测方法的建立. 赵冬敏,吴青,赵翰飞,刘青涛,杨婧,黄欣梅,刘宇卓,韩凯凯,毕可然,李银. 2019

[8]猪流感病毒SYBR GreenⅠ定量RT-PCR检测方法的建立及应用. 张鹏超,师小潇,哈卓,刘永杰,刘惠莉. 2010

[9]猪流感病毒LAMP检测方法的建立. 张莉,鄢明华,李秀丽,路超,王利丽,韩伟,孙英峰. 2014

[10]H1N1亚型猪流感病毒M基因、NS基因克隆与序列分析. 王艳艳,鄢明华,李秀丽,张丽,孙英峰,常维山. 2010

[11]H_1N_1亚型猪流感病毒分离鉴定. 鄢明华,李秀丽,韩伟,高荣玲,申树权,陈龙宾,侯俊辉,王东. 2011

[12]硫酸酯化酵母β-葡聚糖活性及其抗猪流感病毒机理研究进展. 孙英峰,路超,杨春蕾,田向学,韩伟,任卫科. 2014

[13]猪流感病毒河南株的分离鉴定和生物学特性. 赵朴,郑玉姝,贾贝贝,刘丽艳,刘兴友,李海燕. 2010

[14]猪流感H3N2型病毒特异性sIgA抗体分泌规律研究. 白昀,舒采松,甘源,倪博,华利忠,吴猛,邵国青,冯志新. 2017

[15]NS1蛋白点突变对猪流感病毒感染细胞的影响. 刘雷,程靖华,石迎,陶洁,李本强,刘惠莉. 2020

[16]猪流感抗体间接ELISA诊断方法的建立. 陈艳,辛晓光,杨焕良,李婷,李海燕,乔传玲,陈化兰. 2006

[17]表达H1N1、H3N2猪流感病毒HA基因重组质粒在小鼠的免疫效力. 胡永浩,包世俊,赵有淑,温峰琴,姚学萍,杨焕良,陈化兰. 2007

[18]两株EA H1N1亚型猪流感病毒在豚鼠体内的复制和传播能力评估. 陶世宇,王增,陈艳,杨焕良,孔晖晖,陈化兰,胡永浩. 2016

[19]猪流感病毒RT-PCR检测方法的建立及初步应用. 王隆柏,车勇良,吴学敏,陈如敬,刘玉涛,周伦江. 2014

[20]中国猪源H5N1和H9N2亚型流感病毒的分离鉴定. 李海燕,于康震,杨焕良,辛晓光,陈君彦,赵朴,毕英佐,陈化兰. 2004

作者其他论文 更多>>

微信小程序