H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的原核表达及其间接ELISA检测方法的初步建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 杨涛

作者: 杨涛;刘明;张云;刘春国;杜绍范

作者机构:

关键词: 禽流感病毒;NS1基因;原核表达;ELISA

期刊名称: 第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集(下)

ISSN:

年卷期: 2005 年

页码: 4

收录情况: CSCD

摘要: 采用RT-PCR技术扩增禽流感病毒A/Goose/HLJ/p46/2003(H5N1)的NS1基因,将其克隆于融合蛋白表达载体pMAL-c2X上。转化DH5α感受态大肠杆菌扩增后提质粒,经BamHI和HindⅢ双酶切鉴定及序列分析表明筛选到重组质粒pc2X-NS1。SDS-PAGE电泳显示重组质粒转化TB1大肠杆菌后,经0.3mmol/L的IPTG诱导,融合蛋白MBP-NS1得到大量表达,融合蛋白以可溶形式存在,分子量约为67ku。Western-blot结果表明融合蛋白MBP-NS1蛋白能够与H5N1亚型活病毒感染康复鸭血清发生特异性反应,而不能够与H5N1灭活苗免疫鸭血清发生反应。初步建...

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