高活力5′-磷酸二酯酶制备及水解RNA的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张一平

作者： 张一平;华洵璐;李靖;谢骏;何义进

作者机构：

关键词： 麦芽根;5′-磷酸二酯酶;核苷酸;超滤;盐析

期刊名称： 生物技术

ISSN： 1004-311X

年卷期： 2010 年 20 卷 01 期

页码： 62-65

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的:获得高活力5′-磷酸二酯酶液,提高核酸RNA酶解效率。方法:采用超滤和盐析技术对从麦芽根浸提液中纯化5′-磷酸二酯酶工艺进行研究,采用单因子试验法优化酶解工艺条件。结果:浸提液依次经过5万Da超滤膜浓缩、40%饱和度硫酸铵盐析、5万Da超滤膜脱盐后,酶活力可达1 500U/ml;第1次超滤膜透过液可作为浸提液循环使用,酶活力是水浸提的1.15倍;第2次超滤膜透过液浓缩5倍后,可回收56.46%硫酸铵,浓缩母液可按1∶2比例循环使用;在底物浓度5.8%、酶用量8%、反应时间2h条件下,RNA酶解率可达95%。结论:初步建立了适合工业化规模的核苷酸生产新工艺。

分类号： Q78

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