链球菌GapC基因重组痘苗病毒的构建及筛选与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李国华

作者： 李国华;李贞;乔军;陈创夫;才学鹏;孟庆玲;丁波

作者机构：

关键词： GapC基因;pSC11质粒;pSC11-GapC;痘苗病毒;rVV-GapC

期刊名称： 西北农业学报

ISSN： 1004-1389

年卷期： 2012 年 21 卷 05 期

页码： 41-45+53

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了研制链球菌性奶牛乳房炎的有效疫苗,首先用PCR方法扩增出停乳链球菌的GapC基因。其次将GapC基因连接到pSC11穿梭质粒上,构建pSC11-GapC重组穿梭质粒。然后在脂质体的介导下将pSC11-GapC转染已感染痘苗病毒的BHK-21细胞,使之与痘苗病毒基因在BHK-21细胞内进行同源重组,得到GapC重组痘苗病毒,用rVV-GapC表示。最后用蓝斑法连续筛选5次rVV-GapC重组毒,再用PCR和Western blot分别检测rVV-GapC的重组和表达情况。结果显示,PCR电泳检测到目的条带,测序结果与GenBank公布的标准序列同源性99%,Western blot试验证明GapC蛋白在重组毒中进行了表达。rVV-GapC构建成功。重组痘苗病毒的构建为链球菌性奶牛乳房炎疫苗的研究奠定基础。

分类号： S852.611

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