一步法CSFV和PRRSV双重实时荧光定量RT-PCR诊断方法的建立与初步应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 袁秀芳

作者： 袁秀芳;路斌;徐丽华;李军星;王一成

作者机构：

关键词： 猪瘟病毒;猪繁殖与呼吸综合征病毒;双重实时荧光定量RT-PCR

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2015 年 27 卷 04 期

页码： 537-543

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的序列,分别设计了1对特异性引物和1条Taq Man探针,建立了一步法检测CSFV和PRRSV双重实时荧光定量RT-PCR方法。结果表明,建立的方法特异性高,与PCV2,PRV,PPV,PEDV,JEV,BVDV无交叉反应;可以检出20个拷贝数的模板RNA,比常规RT-PCR方法的灵敏度高10倍;对同一样品进行4次重复试验,变异系数(CV)低于4%,方法重复性好。应用建立的荧光定量RT-PCR和常规RT-PCR对50份疑似病例组织进行检测,结果荧光定量RT-PCR检出30份PRRSV阳性,13份CSFV阳性,均高于常规RT-PCR方法的检出数(24份PRRSV阳性,10份CSFV阳性)。本研究建立的双重实时荧光定量RT-PCR方法具有快速、特异性好、灵敏度高的特点,可用于PRRSV和CSFV的实验室快速诊断和流行病学调查。

分类号： S852.651

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