拼接信号序列单碱基变异提高马传染性贫血病毒mRNA拼接效率

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘相冬

作者： 刘相冬;张宝山;王滨有;杨威;孙成群;周家喜;王凯波;孔宪刚

作者机构：

关键词： 马传染性贫血病毒;mRNA拼接效率;拼接信号;Rev

期刊名称： 病毒学报

ISSN： 1000-8721

年卷期： 2003 年 19 卷 04 期

页码： 336-341

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 分别以马传染性贫血(马传贫)驴强毒(D-AEIAV)RNA和马传贫驴白细胞弱毒疫苗(DLAEIAV)RNA为模板,利用RT-PCR的方法,克隆到马传贫强、弱毒株基因组外显子-2及其下游的核苷酸序列。然后将报告基因CAT插入到EIAV内含子2env阅读框架中,构成CAT拼接报告系统。同时在强毒株重组表达质粒的基础上,将其外显子-3上游拼接受体位点的核苷酸序列CAG突变为弱毒株相应位置的核苷酸序列TAG,得到强毒单核苷酸突变株重组表达质粒。用构建的3个重组表达质粒DNA转染驴血白细胞,ELISA检测转染细胞CAT浓度。结果表明:EIAV强毒株重组表达质粒中CAT蛋白表达量最高,EIAV强毒株重组表达质粒次之,EIAV强毒突变株重组表达质粒最低。由于CAT基因被插入于各重组质粒中的EIAV内含子-2里,EIAV外显子-2、3之间的拼接可导致该基因的删除,因而其拼接效率低于EIAVmRNA外显子-2、3之间的拼接效率。实验数据表明,EIAVSA2拼接信号序列单碱基变异提高了SD2-SA2拼接效率;D-AEIAVSA2-SD2拼接效率比DLAEIAV相应位点拼接效率高。

分类号： S852.65

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