大丽轮枝菌原生质体的制备及再生

文献类型： 中文期刊

第一作者： 赵小强

作者： 赵小强;陈志荣;何芳;沈楠;高峰;黄家风

作者机构：

关键词： 大丽轮枝菌;原生质体制备;再生条件;转化

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2018 年 07 期

页码： 166-173

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)原生质体的制备和再生体系,采用单因素分析法分析了大丽轮枝菌摇培时间、裂解酶浓度、酶解时间和温度、渗透压稳定剂的种类和浓度及pH对原生质体释放的影响;从再生培养基、培养基Agar浓度和酶解时间对原生质体的再生条件进行了优化;并对优化条件下获得的原生质体进行了GFP瞬时表达。结果表明,将分生孢子培养18 h收集菌丝体,以1.2 mol/L的KCl作为渗透压稳定剂,在pH 6.0的条件下,加入10 mg/m L的裂解酶,30℃酶解4 h时,获得的原生质体产量最高,达到3.3×10~7个/mL;在Agar浓度为0.5%的TB3再生培养基中进行原生质体再生,再生率最高,可达22.45%;GFP瞬时表达结果表明,优化条件下获得的原生质体可用于遗传转化材料。

分类号： S432.44

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