猪流行性腹泻病毒变异株N基因的克隆及原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙冰

作者： 孙冰;李彬;何孔旺;郭容利;倪艳秀;俞正玉;姜平

作者机构：

关键词： 猪流行性腹泻病病毒;N基因;序列分析;蛋白表达

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2014 年 46 卷 05 期

页码： 72-76

收录情况： 北大核心

摘要： 猪流行性腹泻病(Porcine epidemic diarrhea,PED)是我国猪群近两年的多发疾病。本试验于2012年在安徽分离到一株猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)AH2012。为研究该变异株N基因的特性,采用RT-PCR方法获得了其N基因片段,经测序后与其他代表性的PEDV基因序列进行同源性比较和遗传进化分析,发现该毒株与近年来在我国流行的几株PEDV变异株同源性在99.3~99.5%之间,进化分析显示该毒株属于目前流行的PEDV变异株。将其克隆到表达载体pET28a(+)中,构建了重组质粒pET28a-N,经测序鉴定正确后,转化至感受态细胞BL21(DE3)中,并进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌可表达分子量为65 ku的融合蛋白,蛋白表达量较高,蛋白免疫印迹结果显示,表达的N蛋白能与PEDV阳性血清发生特异性的免疫反应,表明原核表达的N蛋白具有良好的反应原性。该研究可为猪流行性腹泻病的流行病学调查、诊断与防控方法的建立奠定基础。

分类号： S852.651

  • 相关文献

[1]猪传染性胃肠炎病毒LY86株N基因序列分析及病毒在猪睾丸细胞上的增殖特性研究. 杨元奇,季艳杰,张金秋,苗晋锋. 2017

[2]犬瘟热病毒Lederle株H,N全基因序列分析及表达研究. 杨应丽,杨兵,赖平安,王金洛,徐福洲. 2007

[3]猪流行性腹泻病毒P55野生毒株主要结构蛋白遗传分析. 高杏丹,陈曦,杨金先,俞伏松,李英英,林天龙,宋铁英. 2013

[4]2014-2018年猪流行性腹泻病毒N基因遗传变化分析. 邢广旭,焦文强,刘运超,王治方,王克领,徐引弟,李海利,张改平. 2019

[5]6株猪流行性腹泻病毒N基因的克隆与分析. 潘孝成,沈学怀,赵瑞宏,戴银,胡晓苗,侯宏艳,周学利,张丹俊. 2019

[6]闵行地区PRRSV的分离鉴定及N基因序列分析. 邢涛,郁星星,张峻,周光胜,张红飞,朱爱军,王顺荣,王海根,张敏,刘传敏,李金贵. 2017

[7]甘肃犬瘟热病毒流行株N蛋白和H蛋白基因的序列分析. 王小辉,王旭荣,郭庆勇,李建喜,李世宏. 2011

[8]鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离及其N基因序列分析. 王希军,胡北侠,黄艳艳,李建亮,姜宁朋,张秀美. 2010

[9]犬瘟热疫苗株CDV_3核蛋白基因全序列测序及分析. 王凤雪,闫喜军,柴秀丽,张海玲,邵西群,罗国良,赵建军. 2007

[10]猪传染性胃肠炎华毒株核衣壳蛋白基因的分子克隆与序列分析. 冯力,时洪艳,刘杰,佟有恩,刘胜旺,李伟杰,朱远茂,孙东波,孔宪刚,王明,马思奇. 2005

[11]贵州辣椒番茄斑萎病毒的分子鉴定. 田雨,李淳,李岩,王莉爽. 2024

[12]广东省狂犬病病毒分离株N基因的序列分析. 陈晶,袁洁,柯昌文,谷文喜,黄元,徐敏,陈少勤,张健騑,宣华,向华. 2010

[13]镰形扇头蜱、亚洲璃眼蜱和血红扇头蜱Aclin基因的克隆和序列分析. 狄清,仝彩玲,郭凤[王寻],周勇志,陈铁桥,周金林. 2010

[14]狂犬病毒CVS株G基因和N基因共表达重组腺病毒载体的构建. 李江涛,殷相平,张金卫,丁农,柳纪省. 2011

[15]鸡传染性支气管炎病毒XJ株N基因的克隆表达及抗原性初步鉴定. 齐晓亮,夏俊,成进,陆桂丽,沙依兰古丽,汪萍. 2010

[16]猪流行性腹泻病毒N基因的原核表达与鉴定. 刘华南,曹伟军,杨帆,张艳,杨华,王松豪,郑海学. 2013

[17]小反刍兽疫病毒N蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备. 周岩岩,李玲霞,吴锦艳,余树芳,李娇阳,刘丹,冯倩,孙晶晶,何苗,魏凡华,尚佑军. 2019

[18]变异猪流行性腹泻病毒M和N双基因融合真核表达及其活性鉴定. 王隆柏,陈秋勇,吴学敏,陈如敬,车勇良,周伦江. 2020

[19]水貂犬瘟热病毒微滴数字PCR检测方法的建立与应用. 闫曼平,商金源,叶京飞,罗国良,王振军,易立,冯二凯,王春霞,赵宗正,陈明军,魏先力,高华,单晓枫,程悦宁. 2023

[20]猫传染性腹膜炎病毒AH1905株N基因的生物信息学分析及原核表达. 王元红,邢雪,李传峰,朱杰,王勇,刘光清. 2020

作者其他论文 更多>>

微信小程序