洋葱(Alliumcepa L.)RAPD-PCR反应体系及扩增程序的优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈沁滨

作者： 陈沁滨;侯喜林;王建军;冷月强;蒋芳玲;薛萍

作者机构：

关键词： 洋葱;RAPD-PCR反应体系;扩增程序;正交设计

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2006 年 22 卷 04 期

页码： 434-438

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立多态性高、稳定性好的洋葱RAPD-PCR反应体系,采用正交设计,研究了Taq酶、Mg2+、引物和dNTP 4种RAPD-PCR反应组分浓度变化对扩增结果的影响,在此基础上对模板DNA用量、扩增程序中退火温度和反应循环次数进行了筛选。试验结果表明,洋葱20μl RAPD-PCR优化反应体系为1×Buffer、2.0 mmo1/L Mg2+、1.0 UTaqDNA聚合酶、200μmo1/L dNTP、0.6μmo1/L引物、2%甘油和15 ng DNA模板;PCR扩增程序为94℃预变性4 m in;94℃变性30 s,35℃退火40 s,72℃延长1.5 m in,45个循环;72℃保温延伸7 m in。

分类号： S633.2

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