犬瘟热病毒血凝蛋白在昆虫细胞中的表达与抗原性分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 全传松

作者: 全传松;姜骞;于作;李博韬;李连峰;曲连东

作者机构:

关键词: 犬瘟热病毒;血凝蛋白;杆状表达系统;B细胞表位

期刊名称: 中国畜牧兽医

ISSN: 1671-7236

年卷期: 2014 年 41 卷 08 期

页码: 25-29

收录情况: 北大核心

摘要: 为获得具有天然构象及良好抗原性的犬瘟热病毒(CDV)血凝蛋白(H),本研究以HLJ2-07毒株为模板,利用RTPCR方法扩增出H基因,将其克隆到pFastBacTMHTA载体中,利用大肠杆菌DH10BacTM同源重组构建穿梭质粒reBACmidrH,将重组穿梭质粒转染Sf9昆虫细胞,进行杆状病毒表达。利用Western blotting对获得的重组蛋白进行鉴定及抗原性分析。同时,利用在线网站与软件对CDV H蛋白进行B细胞表位分析预测。结果显示,在杆状病毒系统中表达的H蛋白能与His-tag单克隆抗体及CDV阳性血清发生特异性反应,表明该蛋白成功表达,且具有良好的反应原性;用Swiss-model同源建模软件及B细胞表位预测软件,预测H蛋白可能具有的B细胞表位有5处,分别是175—195、240—250、365—380、480—508及526—555。本研究获得了具有天然构象及良好抗原性的CDV重组H蛋白,可为诊断试剂开发、单克隆抗体制备及表位筛选等工作奠定基础。

分类号: S852.65

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