猪肺泡/羊水表面活性蛋白A的分离纯化及抗菌和抗病毒活性的分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张永红

作者： 张永红;霍珊珊;张建楼;徐建;左玉柱;王利月;崔丹;李秀锦;仲飞

作者机构：

关键词： 猪表面活性蛋白A;麦芽糖-sepharose;抗菌活性;抗病毒活性

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2017 年 07 期

页码： 1309-1315

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为探讨猪肺泡表面活性蛋白A(SP-A)的抗菌和抗病毒活性,需要从猪肺泡液和羊水中分离纯化SP-A。首先通过化学交联法将麦芽糖共价交联在Sepharose胶粒上,制成能够与SP-A结合的胶粒,即麦芽糖-Sepharose(MS)。采集肺泡灌洗液(BLAF)和羊水(AF),以11 000r/min转速离心40 min获得富含SP-A的沉淀;将沉淀溶解于含8mol/L尿素的缓冲液I中使SP-A变性,再以无尿素的缓冲液I透析使其复性。然后在含Ca2+的结合缓冲液中用MS吸附SP-A,用含EDTA的洗脱液洗脱,洗脱的SP-A过Sephadex G-75凝胶柱得到纯化的SP-A。SDS-PAGE和Western blot鉴定结果显示:在相对分子质量为35 000和70 000处出现特异的SP-A蛋白带(或杂交带)。菌体凝集试验显示:SP-A具有凝集E.coli的作用,表明制备的SP-A具有生物活性。抑菌试验证实SP-A对致病性E.coli、肠沙门杆菌、肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌的增殖均有不同程度的抑制作用,特别是对E.coli和肠沙门杆菌抑制作用更为明显。抗病毒检测结果显示:SP-A可明显抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在MARC-145细胞中的增殖,同时对猪细小病毒(PPV)在PK-15细胞中的增殖也有一定的抑制作用。结果表明:制备的猪SP-A在体外具有明显的抗菌和抗病毒活性,这为以后进一步研究猪SP-A的生物学特性及抗菌、抗病毒活性提供了必要的条件。

分类号： S859.79

  • 相关文献

[1]鸭β-防御素16的分离、鉴定及其抗病毒机制. 张可心,张名岳,辛胜男,韩宗玺,邵昱昊,刘胜旺,马得莹. 2012

[2]5个新的鸭β-防御素的分离、鉴定及其抗病毒机制的初探. 张可心,蔺丽娟,韩宗玺,邵昱昊,刘胜旺,马得莹. 2012

[3]鸭viperin基因的克隆、表达及Viperin蛋白的抗病毒活性. 韩凯凯,李文良,李银,毕可然,刘宇卓,刘青涛,赵冬敏,杨婧,黄欣梅. 2017

[4]MDCK细胞ISG15基因的克隆表达及抗病毒活性分析. 刘爱玲,潘杰,庞运倩,于可响,马秀丽,宋敏训. 2015

[5]Nonapeptide突变体制备及抗新城疫病毒活性研究. 王曙阳,梁剑平,陈积红,韩跃武,薄永恒,曹云飞. 2010

[6]一株烟草花叶病毒生防细菌的鉴定及代谢物活性研究. 申莉莉,王凤龙,钱玉梅,杨金广,陈德鑫,张爱东,张杨. 2009

[7]犬干扰素α2的原核表达及抗病毒活性分析. 姚凌云,王晶宇,欧阳伟,钱晶,吴世妍,夏兴霞,诸玉梅,王晓丽,潘群兴,芮荣,王永山. 2018

[8]犬瘟热病毒H蛋白单克隆抗体的制备与鉴定. 孙伟伟,钱晶,王晶宇,欧阳伟,夏兴霞,王晓丽,诸玉梅,马孙婷,王永山,徐业芬. 2019

[9]具有农药活性的微生物源核苷类化合物. . 2019

[10]犬干扰素α2与犬白蛋白融合基因在昆虫细胞中的表达与活性分析. 王晶宇,欧阳伟,钱晶,王晓丽,夏兴霞,诸玉梅,毕振威,王永山. 2019

[11]基于结构多样化衍生的抗植物病毒药剂研究进展. 姚键梅,蒲璐璐,饶家瑞,王敏,郭灿,雷志伟. 2021

[12]放线菌Yn168菌种鉴定及其发酵条件对抗病毒活性的影响. 田兆丰,刘霆,张涛涛,李永丹,董丹,刘伟成. 2013

[13]阿魏酸酰腙类化合物的合成及抗病毒活性. 王珍珍,王晓斌,金林红. 2020

[14]海洋硫酸多糖PAE的结构和抗病毒活性研究. 王姝垚,刘志纯,秦玲,何美佳,杨亚靖,毛文君. 2019

[15]重组鸡γ-干扰素在家蚕中的表达及抗病毒活性. 赵泽,赵璐璐,刘兴健,王朋,李轶女,张志芳,易咏竹. 2018

[16]小链霉菌Ynl68发酵产物抗植物病毒活性的研究. 田兆丰,刘伟成,刘霆,董丹. 2011

[17]桑叶提取物的抗病毒活性检测. 王辉,吴莎,孙毅凡,江振友,廖森泰,刘凡. 2011

[18]具有农用活性海洋真菌菌株的筛选和鉴定. 寸靖芳,任广伟,徐蓬军,王秀芳. 2024

[19]猪α干扰素的表达及在PAM细胞系中抗PRRSV活性检测. 万博,鲍登克,乔松林,徐德,杨苏珍,王彦斌,张改平. 2010

[20]干扰素-ε研究进展. 张海玲,廉士珍,张东亮,白雪,章沙沙,张蕾,李伟,刘方圆,王菡,胡博,卢士英. 2021

作者其他论文 更多>>

微信小程序