乙型肝炎表面抗原基因植物高效表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 林炳英

作者： 林炳英;金志强;李梅

作者机构：

关键词： 启动子;2A12;E8;乙型肝炎表面抗原;植物

期刊名称： 中西医结合学报

ISSN： 1672-1977

年卷期： 2006 年 06 期

页码： 639-643

摘要： 目的构建果实特异性启动子驱动的含乙肝表面抗原(hepatitis B virus surface antigen, HBsAg)植物表达载体,进一步提高外源目的基因的表达量,为研制有效的转基因植物防乙肝病毒疫苗打下基础。方法将番茄果实特异性启动子基因2A12和E8 ,分别插入到pBPFΩ7构建中间载体pB2A12和pBE8 ;酶切YEP-HBs载体中的HBsAg小蛋白,并插入到pB2A12和pBE8 ,得到载体pB2A12-HBs和pBE8-HBs ;将其中“p35S+2A12 +Ω+HBsAg-s +Tnos”片段和“p35S +E8 +Ω+HBsAg-s +Tnos”片段分别亚克隆到pCAMBIA1301 ,得到植物表达载体pCAM2A12-HBs和pCAME8-HBs。测序鉴定pCAM2A12-HBs、pCAME8-HBs中的启动子和HBsAg片段。最后将pCAM2A12-HBs、pCAME8-HBs转化根癌农杆菌EHA105。结果重组质粒用酶切鉴定均得到预期片段,pCAM2A12-HBs、pCAME8-HBs的测序结果正确。结论本实验成功构建了番茄果实特异性启动子和Ca MV35S组成型启动子共同驱动HBsAg基因的植物表达载体。

分类号： R392

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