大葱ISSR反应体系的建立及优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 贾俊香

作者： 贾俊香;崔连伟;李娜;姜滨滨

作者机构：

关键词： 大葱;ISSR;反应体系;单因素试验;正交设计

期刊名称： 北方园艺

ISSN： 1001-0009

年卷期： 2017 年 12 期

页码： 92-96

收录情况： 北大核心

摘要： 以大葱嫩叶为试材,采用单因素试验和正交实验探讨了Mg~(2+)浓度、dNTPs浓度、引物浓度、TaqDNA聚合酶用量、模板DNA以及Buffer用量对大葱ISSR-PCR扩增的影响,建立了大葱ISSR反应体系。结果表明:优化后的最佳反应体系为10μL反应体系中,10×Buffer缓冲液1.0μL,Mg~(2+)浓度为2.0mmol·L~(-1),dNTPs浓度为0.3mmol·L~(-1),引物浓度为0.65μmol·L~(-1),Taq酶1.0U,模板DNA为60ng,用灭菌的超纯水补齐体积至10μL。对大葱71份样品材料进行ISSR-PCR扩增体系的检测结果显示,该优化体系扩增的产物条带清晰,稳定性高,为大葱种质ISSR分子标记遗传结构分析提供参考依据。

分类号： S633.1

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