高致病性PRRSV JL-04/12株核衣壳蛋白的表达与抗原性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王凤雪

作者： 王凤雪;刘莹;杨勇;朱洪伟;孙娜;刘杏;程世鹏;温永俊

作者机构：

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;核衣壳蛋白;原核表达;纯化

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2015 年 10 期

页码： 60-64

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得高浓度、高质量的有效原核表达蛋白作为ELISA诊断抗原,通过RT-PCR法扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)JL-04/12株的核衣壳蛋白(N蛋白)基因并克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,转入到大肠埃希菌BL-21感受态细胞,经IPTG诱导表达,通过温度和IPTG浓度的优化,进行重组蛋白的高效表达,经SDS-PAGE和Western blot对表达产物的特性进行分析,利用GST柱纯化表达蛋白,并免疫小鼠,ELISA检测其刺激产生抗体的能力-抗原的免疫原性。结果表明,0.1mmol/L的IPTG、28℃诱导4h可高效诱导重组蛋白的表达,在表达上清中目的蛋白达40%,原核表达的重组N蛋白可诱导小鼠产生抗体,抗体效价为1∶256。原核表达的N蛋白与PRRSV具有相同的抗原性。

分类号： S855.3

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