一步法RT-PCR扩增PRSV海南分离物全长基因组cDNA

文献类型： 中文期刊

第一作者： 庹德财

作者： 庹德财;沈文涛;高乐;言普;周鹏

作者机构：

关键词： 番木瓜环斑病病毒;全长基因组cDNA;克隆与测序

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2011 年 07 期

页码： 1347-1351

收录情况： CSCD

摘要： 以植物总RNA提取试剂盒提取的高纯度的总RNA为模板,使用Oligo dT-Adaptor和Random9引物合成了番木瓜环斑病病毒海南分离物(PRSV HN-2)的cDNA第一链,基于已报道的PRSV全长基因组序列,设计合成了一对引物,一步法RT-PCR扩增出PRSV海南分离物全长基因组cDNA。为了验证获得的全长基因组cDNA的正确性,并以扩增出的全长cDNA为模板,将PRSV全长基因组分成A、B 2个大片段进行扩增,应用T载体进行克隆和测序以验证所获得的全长基因组cDNA序列的正确性。测序结果显示,该cDNA序列与国内外报道的PRSV各分离物全长核苷酸序列的相似性很高,表明本文建立的一步法RT-PCR扩增PRSV全长基因组cDNA的方法正确、可行。

分类号： S432.41

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