牛分支杆菌热休克蛋白65基因的分子克隆和表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘思国

作者： 刘思国;王春来;彭永刚;宫强;王牟平

作者机构：

关键词： 牛分杆杆菌;HSP65基因;分子克隆;原核表达

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2004 年 26 卷 05 期

页码：

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以牛型分枝杆菌Vallee菌株基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增热休克蛋白65(Hsp6S)基因,PER产物经纯化与EcoR Ⅰ/Sal Ⅰ双酶切后与经同样处理的原核表达载体pGEX-6P-1进行连接,转化感受态细胞BL21中,筛选和构建了原核重组表达质粒pGEX-H65,核苷酸序列测定验证其正确性。以1 Mol/LIPTG诱导,进行SDS-PAGE电泳。结果表明,Hsp65基因表达的融合蛋白GST-H65裂解为两部分;即64kD和22kD,两个蛋白分子量相加与预测的86kD(HsP60 kD+GST26 kD)相符。牛分支杆菌热休克蛋白HSP65的成功表达为其功能的研究打下基础。

分类号： S852.61

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