罗非鱼β-肌动蛋白基因启动子的分离及其启动子活性的初步检测

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郁二蒙

作者： 郁二蒙;叶星;王海英;白俊杰;夏仕玲;劳海华;卢迈新

作者机构：

关键词： 罗非鱼;β-肌动蛋白启动子;红色荧光蛋白;转基因;显微注射

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2008 年 16 卷 02 期

页码： 242-247

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用高保真PCR技术从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)基因组中分离了β-肌动蛋白(β-actin)基因片段(GenBank登录号:EF026001)。序列分析显示该片段包括长为1643bpβ-actin基因5'端侧翼区的启动调控区和90bp的部分转录区序列。启动调控区包括一段长为108bpβ-actin基因上游调控序列、β-actin基因不翻译的第1个外显子和第1个内含子。上游调控序列中含有与转录活性密切相关的作用元件:CAAT box,TATA box和CArG box,分别位于转录起始位点上游的-92、-29和-62处。将尼罗罗非鱼β-actin基因的启动调控区定向克隆到不含启动子的红色荧光表达载体pDsRed2-1中,构建了重组荧光表达载体。重组载体经EcoRⅠ线性化后,采用显微注射技术将其注射到唐鱼(Tanichthys albonubes)的受精卵中,利用荧光显微镜观察外源基因增强型红色荧光蛋白基因(DsRed2)在唐鱼中的表达。结果表明,在荧光显微镜下以及普通解剖镜下均可观察到红色荧光,说明本实验分离到的罗非鱼β-actin基因启动子序列具有有效的驱动功能。

分类号： S917.4

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