H3N2亚型猪流感病毒反向遗传操作技术平台的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 宫晓倩

作者： 宫晓倩;汪秀会;阮宝阳;刘晓敏;周艳君;郑浩;童武;李泽君;童光志;于海

作者机构：

关键词： 猪流感;H3N2亚型;反向遗传操作技术;生长曲线;空斑形态

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2015 年 08 期

页码： 781-786

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了构建猪流感病毒A/swine/Heilongjiang/1/2005(H3N2)的反向遗传操作技术平台,利用RT-PCR扩增了H3N2亚型猪流感病毒的8个基因片段,分别连接到pBD双向转录表达载体上。将8个重组质粒纯化后,共转染293T细胞,48h后收集上清,接种MDCK细胞。当MDCK细胞呈现明显病变时,收集上清,做血凝试验,检测出有血凝现象。通过MDCK细胞病变情况、生长曲线、空斑形态等验证拯救病毒的可靠性,结果发现:野生毒株和拯救毒株在MDCK细胞上引起的病变情况基本一致,生长曲线的测定结果没有明显差异,空斑形态也极其相似。H3N2亚型猪流感病毒的成功拯救为猪流感病毒的致病机理、传播机制、基因功能研究以及疫苗研发奠定了基础。

分类号： S852.651

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