检测牛IFN-γ 双抗体夹心 ELISA 的建立及在牛结核病诊断上的初步应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张改梅

作者： 张改梅;贾红;侯绍华;鑫婷;郭晓宇;袁维峰;刘淑清;吴竞;高新桃;李明;董瑞凯;朱鸿飞

作者机构：

关键词： 牛结核病;IFN-γ;双抗体夹心ELISA;临床诊断

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2014 年 45 卷 10 期

页码： 1693-1698

收录情况： CSCD

摘要： 本研究旨在建立牛IFN-γ 体外释放法,为牛结核病的免疫学诊断提供一种快速、有效的新检测技术。分别以获得的牛IFN-γ单克隆抗体Bo-mAb_1作为捕获抗体,以Bo-mAb_2~H 作为检测抗体,建立了基于双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)的牛IFN-γ体外释放法。该方法的最低检出限为3.12ng· mL~(-1),可特异性检测出重组牛IFN-γ(Bac-BoIFN-γ)及天然BoIFN-γ,而与猪、犬、鸡的天然IFN-γ 无交叉反应。批内、批间变异系数小于5.11%。临床检测结果显示,与结核菌素皮内变态试验(TST)、进口Bovigam~(TM)试剂盒检测的符合率分别为88.7% 和95.3%。结果表明,DAS-ELISA法具有良好的敏感性、特异性及精确度,可用于临床样品的检测,为监测牛结核病特别是其早期感染提供了强有力的检测技术手段。

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