马铃薯六种主要病毒通用RT-PCR检测体系的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张威

作者： 张威;白艳菊;景芝;范国权;高艳玲;申宇;张抒;孟宪欣;王军

作者机构：

关键词： 马铃薯;PVX;PVY;PVS;PLRV;PVM;PVA

期刊名称： 中国马铃薯

ISSN： 1672-3635

年卷期： 2015 年 04 期

页码： 222-227

摘要： 马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)、马铃薯M病毒(PVM)和马铃薯A病毒(PVA)是马铃薯生产田中发生率较高、危害较严重的病毒,因此,建立特异性强、灵敏度高、检测速度快的RT-PCR分子检测体系对保障马铃薯种薯质量具有非常重要的意义。试验筛选了6种病毒的特异引物、优化了PCR部分的试剂以及确定了退火温度。结果表明,当Mg2+浓度为2.6 mmol/L、d NTPs浓度为0.1 mmol/L、Taq DNA聚合酶浓度为0.03 U/μL,以及退火温度为55.5℃时反应体系最稳定。最终,建立了一套通用RT-PCR检测体系,只需要变换每种病毒的引物,就可以实现对PVX、PVY、PVS、PLRV、PVM和PVA病毒的RT-PCR检测。每种病毒检测灵敏度均能达到pg以上。

分类号： S435.32

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