北极狐γ-干扰素cDNA的克隆、表达及活性测定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张海玲

作者： 张海玲;柴秀丽;罗国良;王凤雪;易立;邵西群;闫喜军

作者机构：

关键词： 北极狐;干扰素-γ;抗病毒活性

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2008 年 24 卷 09 期

页码： 1625-1630

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究狐γ-干扰素的生物学活性,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从北极狐外周血淋巴细胞中扩增出γ-干扰素(VuIFN-γ)cDNA。序列分析表明VuIFN-γcDNA全长501bp,编码23个氨基酸的信号肽和144个氨基酸的成熟肽蛋白,与已发表的银黑狐和犬IFN-γ核苷酸序列同源性为99.8%和99.4%;氨基酸同源性均为100%。应用原核表达系统高效表达北极狐γ-干扰素成熟肽蛋白,SDS-PAGE和Western blotting分析表达的融合蛋白分子量约为19kD,以不溶性的包涵体形式存在。重组蛋白经纯化和复性,在Vero和MDCK细胞上可明显抑制VSV病毒的复制,并测出北极狐重组γ-干扰素的活性单位分别为1.0×106u/mg和1.56×105u/mg,为进一步开发基因工程狐干扰素奠定基础。

分类号： Q78

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