金色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌和副溶血弧菌单管多重PCR检测方法的建立及初步应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 吴永生

作者： 吴永生;刘思国;何浩;王春来;宫强;彭永刚;王牟平;罗公平;魏凤祥;孔宪刚

作者机构：

关键词： 多重PCR;金黄色葡萄球菌;副溶血性弧菌;伤寒沙门氏菌

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2006 年 28 卷 04 期

页码： 436-440+445

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究根据金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,SA)耐热核酸酶(nuc)基因、伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphi,ST)鞭毛抗原(H1-d)基因和副溶血性弧菌(Vibrioparahaemolyticus,VP)热稳定直接溶血素(tdh)基因,分别设计了三对引物Nuc-F/Nu-R、H1-d-F/H1-d-R和Tdh-F/Tdh-R,预计PCR扩增的DNA片断分别为279bp、202bp和458bp。通过对单个基因PCR和单管多重PCR扩增的特异性、敏感性分析以及对单管多重PCR扩增条件如引物浓度、退火温度和dNTP浓度等的优化,建立了快速检测金黄色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌和副溶血弧菌的单管多重PCR方法,该方法检测的敏感性分别为:47.8pgST的基因组DNA,22.7pgSA的基因组DNA和0.3745pgVP的基因组DNA。模拟试验显示最低检测限度为分别为:SA150CFU/反应体系,ST98CFU/反应体系,VP53CFU/反应体系。表明该方法具有很好的应用价值和开发前景。

分类号： R450

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