小分子RNA表达载体构建的新方法——MicroRNA前体PCR置换法

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈锐

作者： 陈锐;胡正;张辉

作者机构：

关键词： 小分子RNA;MicroRNA;PCR置换法

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2010 年 07 期

页码： 101-105

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： MicroRNA(miRNA)基因的终产物是进化上高度保守的、具有基因表达调控功能的非编码小分子RNA。miRNA的特征性发卡环前体(pre-miRNAs)在体内经数步加工后,与AGO蛋白构成沉默复合体(RISC)以行使其功能。如将已知pre-miRNAs上的miRNA成熟链和互补链(miRNA*)分别置换为有待研究的小分子RNA,并构建表达载体转化植株,利用转化株内源的miRNA成熟加工体系,可以产生预设的小分子RNA。利用已知拟南芥miRNA前体为模板,使用替换PCR的方法,人工构建了gso8-ap-miRNA-pBI121表达载体。利用农杆菌介导法转化拟南芥,多数T1代植株表现出提早开花的突变表型。该方法是一种简便、高效的构建小分子RNA表达载体的方法。

分类号： Q78

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