巴西橡胶树HbPSKR2基因克隆及互作蛋白鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杜晓愚

作者： 杜晓愚;赵一杰;张世鑫;田维敏;晁金泉

作者机构：

关键词： 巴西橡胶树;HbPSKR2;酵母双杂交;荧光素酶互补成像;互作蛋白

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2024 年 45 卷 004 期

页码： 653-662

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 磺肽素是一种高等植物特有的小肽类激素,广泛参与植物的生长发育、分裂分化、生物或非生物胁迫等生物学过程.磺肽素受体蛋白(phytosulfokine receptor,PSKR)是磺肽素的直接受体,对于磺肽素信号传导至关重要.本研究采用RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction)技术克隆了橡胶树的HbPSKR2 基因,并对其进行生物信息学、基因表达模式、互作蛋白筛选及鉴定分析.结果显示HbPSKR2 基因的开放阅读框全长 3159 bp,编码 1052 个氨基酸,理论分子量为 114.84 kDa,理论等电点为 6.34.结构域分析显示HbPSKR2 属于典型的跨膜蛋白,前 640 个氨基酸是由亮氨酸重复组成的天线结构,第 692~714 个氨基酸是跨膜结构域,第 765~1052 个氨基酸是膜内激酶结构域.对HbPSKR2 膜内激酶结构域以及拟南芥和水稻的PSKR同源序列进行多重比对,结果显示均存在ATP binding site、CaM binding site、Activation segment、GC Centre等保守性位点.表达模式分析显示,HbPSKR2 基因在橡胶树形成层区高丰度表达,其表达量在冠菌素处理前期显著上升.通过酵母双杂交技术筛选到 12 个与HbPSKR2 互作的候选蛋白,并对其中的 2 个蛋白激酶(HbPBL8 和HbPIX13)与HbPSKR2 的互作关系进行荧光素酶互补成像验证.结果显示,在烟草中共转化HbPSKR2-nLUC/HbPBL8-cLUC和HbPSKR2-nLUC/HbPIX13-cLUC可以观察到强烈的荧光信号,进一步证明了HbPSKR2 在体内可与HbPBL8 激酶和HbPIX13 激酶互作.橡胶树HbPSKR2 基因克隆及互作蛋白鉴定将为深入揭示橡胶树乳管分化分子机制提供新的思路.

分类号： S794.1

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