KIF3A通过结合Wnt/β-catenin通路中的β-arrestin参与哮喘气道上皮的炎症调控
文献类型: 中文期刊
第一作者: 杨丽丽
作者: 杨丽丽;王亚苹;薛坤娇;阮玲瑛;符州;耿刚
作者机构:
关键词: KIF3A;β-arrestin;Wnt/β-catenin;哮喘;气道炎症
期刊名称: 第三军医大学学报
ISSN: 1000-5404
年卷期: 2021 年 06 期
页码: 496-502
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 目的研究KIF3A参与哮喘气道炎症调控的可能机制,为哮喘治疗提供新的靶点和方向。方法选取20只雌性6~8周龄C57BL/6小鼠建立哮喘模型,随机分为哮喘组与对照组(n=10)。Western blot和免疫组化(IHC)检测两组小鼠KIF3A的表达;在体外分别用磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution, PBS)和屋尘螨(house dust mite, HDM)干预人支气管上皮细胞16HBE,Western blot和RT-PCR检测KIF3A的表达;构建含有KIF3A的过表达组(LV-KIF3A-45894-J2,LV-KIF3A)和RNA干扰序列的慢病毒载体组(LV-KIF3A-RNAi-81183-1,RNAi),用含有空载的慢病毒和阴性对照序列的慢病毒载体作为对照,分别感染16HBE;免疫共沉淀检测过表达组中KIF3A与β-arrestin的结合,同时Western blot和RT-PCR检测各组细胞β-catenin的表达水平,RT-PCR检测KIF3A基因差异表达对趋化因子CCL-17和CCL-26表达的影响。结果哮喘组的KIF3A表达水平较对照组减少(P<0.05)。HDM干预16HBE后的KIF3A蛋白和mRNA表达水平较对照组有下降趋势,但无统计学差异(P>0.05)。慢病毒载体感染16HBE 72 h且经流式分选绿色荧光阳性细胞后,RT-PCR和Western blot结果显示LV-KIF3A组和RNAi组的KIF3A蛋白和mRNA表达分别增多(P<0.05)和下降(P<0.05)。免疫共沉淀证实KIF3A与β-arrestin相结合。LV-KIF3A组和RNAi组的β-catenin蛋白总量无明显差异;与对照组相比,RNAi组的β-catenin mRNA表达显著下降(P<0.000 1),LV-KIF3A组则无统计学差异。RT-PCR结果显示,与对照组相比,RNAi组的趋化因子CCL-17和CCL-26的mRNA水平增加(P<0.001),LV-KIF3A组则降低(P<0.05)。结论 KIF3A与Wnt/β-catenin通路中的β-arrestin结合,通过调节趋化因子CCL-17和CCL-26的表达而参与哮喘气道上皮炎症的调控。
分类号: R562.25
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