牦牛METTL14 CDS区克隆及表达谱分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 马兰花

作者： 马兰花;顾亚荣;张永峰;潘和平;阎萍

作者机构：

关键词： 大通牦牛;甲基转移酶样蛋白14;生信分析;时空表达规律

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2022 年 005 期

页码： 962-972,980

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在克隆牦牛甲基转移酶样蛋白（methyltransferase-like protein 14,METTL14）基因的编码区（CDS）序列，探究其分子特征及时空表达规律。以大通牦牛脂肪组织cDNA为模板，通过克隆获得METTL14的完整CDS区序列，用生物学软件进行基因序列和蛋白质结构分析，利用qRT-PCR检测METTL14的时空表达规律。结果显示，大通牦牛METTL14的CDS区全长1 371 bp,共编码456个氨基酸；METTL14亲缘关系与野牦牛最近，与鸡和小鼠最远；氨基酸等电点是5.89,不稳定系数（Ⅱ）为52.02,GRAVY=-0.878,METTL14总体表现出强的亲水性；METTL14有1个大小为177 aa的MT-A70酶保守结构域，无信号肽与跨膜结构域；亚细胞定位与核定位预测分析都显示METTL14位于细胞核（69.60%）。推测METTL14共有40个潜在的磷酸化位点。METTL14蛋白高级结构由无规则卷曲（51.10%）、α-螺旋（33.11%）、延伸链（11.84%）和β-转角（3.95%）相互连接而成。METTL14与甲基化修饰相关蛋白相互作用，主要参与RNA甲基化修饰过程。qRT-PCR结果显示，METTL14基因在牦牛7个组织中均有表达，相比脂肪组织中的表达，背最长肌中表达量最高（P<0.001）;在牦牛生长发育的不同阶段，前体脂肪细胞中METTL14的表达量也有差异，30月龄>18月龄（P<0.05）;进一步研究发现，在牦牛前体脂肪细胞分化过程中，METTL14表达量在0,4,8,12 d呈现上升的趋势，在4,8 d的表达量显著高于0 d（P<0.05）,12 d的表达量极显著高于0 d（P<0.01）。结果表明，大通牦牛METTL14是一个具有MT-A70酶保守结构域的定位在细胞核上的酸性不稳定水溶性蛋白，在牦牛脂肪沉积过程中发挥着重要的作用。本试验进一步为METTL14在牦牛脂肪沉积中的调控机制研究奠定理论基础。

分类号： S823.85

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