多倍体西瓜染色体制片技术改良及其核型分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李桂芬

作者： 何毅;覃斯华;黄金艳;柳唐镜;洪日新;李天艳;樊学军;韦正光;李文信

作者机构：

关键词： 多倍体西瓜;染色体制片;荧光染色;核型分析

期刊名称： 南方农业学报

ISSN： 2095-1191

年卷期： 2017 年 48 卷 04 期

页码： 663-668

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】改良多倍体西瓜染色体标本制片技术,比较多倍体西瓜常规核型分析与荧光核型分析结果,为西瓜细胞遗传学研究及辅助构建西瓜物理遗传图谱提供参考依据。【方法】以多倍体西瓜为材料,以传统染色体制片方法去壁—低渗火焰干燥法为基础,去掉其前低渗和后低渗两个步骤,合并其再固定与火焰涂片两个步骤,用吉姆萨染色剂和荧光染料DAPI分别对多倍体西瓜染色体进行常规染色和荧光染色,并进行核型分析。【结果】使用改良型酶解去壁火焰干燥法进行多倍体西瓜染色体制片,比传统去壁—低渗火焰干燥法简化了用KCl溶液前低渗、后低渗及用卡诺固定液再固定3个步骤,可缩短制片时间1.0~2.0 h,提高制片效率,获得的染色体样本数目齐全、分散良好、形态清晰。用DAPI染色比用吉姆萨染色更容易检测到细胞中期分裂相,每张玻片可缩短检测时间0.5~1.5 h;染色体的着丝点、长臂及短臂形态更清晰。【结论】采用改良染色体制片方法可提高多倍体西瓜染色体的制片效率,对该制片进行荧光核型分析比常规核型分析更准确,效率更高。

分类号： S651

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