应用复合多聚酶链反应方法快速鉴别伪狂犬病弱毒疫苗与野毒

文献类型： 中文期刊

第一作者： 冉智光

作者： 冉智光;童光志;孔令达;仇华吉;张绍杰;李亚香;王玉春;陈焕春

作者机构： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,重庆市畜牧兽医科学研究所,华中农业大学畜牧兽医学院

关键词： 伪狂犬病病毒,PCR,鉴别诊断

期刊名称： 中国兽医杂志

ISSN： 0529-6005

年卷期： 1999 年 05 期

页码：

收录情况： 北大核心

摘要： 本研究根据伪狂犬病病毒（ＰｒＶ）共有ｇＢ和疫苗株缺失的ｇＥ基因序列分别设计并合成１对通用（ＰＢ１／ＰＢ２）和１对鉴别引物（ＰＥ１／ＰＥ２），以在我国广泛使用的疫苗株Ｂａｒｔｈａ－Ｋ６１及从国内外收集的野毒株Ｓ、ＳＵ、Ｆ、Ｌ、Ｙ、Ｍｉｎ－Ａ、Ｓｈｏｐｅ、Ｓ（川）、ＳＬ１、１０＃、ＥＡ（鄂Ａ）ＤＮＡ为模板在同一反应管中同时扩增ｇＢ和ｇＥ基因序列建立了复合多聚酶链反应（ＰＣＲ）方法。ＰＣＲ产物经２．０％琼脂糖凝胶电泳显示，从所有１１株野毒ＤＮＡ中都扩增出３７２ｂｐ和５２６ｂｐ两个片段，而Ｂａｒｔｈａ－ｋ６１只扩增出３７２ｐｂ一个片段。酶切分析证明ＰＣＲ产物是特异性的。ｇＢ基因是ＰｒＶ主要保护性抗原基因，是病毒复制必需的，强弱毒都有此基因；Ｂａｒｔｈａ－Ｋ６１株是ｇＥ基因缺失的弱毒。所以，本实验建立的方法通过１次ＰＣＲ即可有效鉴别疫苗毒与野毒。这一方法将在今后根除伪狂犬病计划中发挥重要作用。

分类号： S852.65,S852.65

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