猪源流感病毒NS1基因的克隆及原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李敏

作者： 李敏;向华;宣华;蔡建平;王贵平

作者机构：

关键词： 猪流感病毒;H3N2;NS1;原核表达

期刊名称： 广东畜牧兽医科技

ISSN： 1005-8567

年卷期： 2009 年 34 卷 02 期

页码： 31-34

摘要： 对H3N2亚型猪流感病毒NS1基因进行原核表达,获得纯化表达产物,以期为检测猪流感抗体的ELISA试剂盒的研制奠定基础。采用RT-PCR方法扩增H3N2亚型猪源流感病毒的NS1基因(693bp),并将该片段克隆至pET-28(a)构建重组表达质粒pET-NS1。将重组质粒转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,以终浓度1mmol/L的IPTG在不同时间进行诱导表达,SDS-PAGE检测蛋白表达情况,并经Western-blot分析表达产物的抗原性。pET-NS1重组表达质粒表达的NS1蛋白相对分子质量约为26kD,1mmol/L的IPTG诱导4h时蛋白表达量达到高峰。Western-blot印迹分析证实表达蛋白能与阳性血清发生特异性反应,而与阴性血清不反应。NS1基因的原核表达产物可用来鉴别流感感染猪群和灭活疫苗免疫猪群。

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]猪流感病毒H3N2亚型PB1-F2蛋白的原核表达. 陈培君,王晓杜,罗金燕,刘超,沈阳,邱亚峰,李向东,王豪举,马志永. 2009

[2]H3N2型猪流感病毒M2蛋白表达分析. 王晓杜,陈培君,沈阳,邱亚峰,邓绪芳,史子学,彭丽娜,罗金燕,刘超,马志永. 2010

[3]H3N2亚型猪流感病毒山东分离株NA基因的扩增和序列分析. 杨焕良,李海燕,辛晓光,于康震. 2003

[4]H3N2亚型猪流感病毒的反向遗传系统的构建及PB2K627E突变对病毒复制能力和致病力的影响. 宫晓倩,汪秀会,阮宝阳,刘晓敏,周艳君,郑浩,童武,李泽君,童光志,于海. 2015

[5]H_3N_2亚型猪源流感病毒NS基因的克隆与序列分析. 李敏,向华. 2009

[6]H3N2亚型猪流感病毒进化分析及重组HA1蛋白间接ELISA诊断方法的建立. 丁选亚,乔传玲,杨焕良,陈艳,辛晓光,韩庆功,陈化兰. 2007

[7]H3N2亚型猪流感病毒血凝素单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定. 陈艳,王飞飞,杨焕良,乔传玲,陈化兰,张秀英. 2021

[8]猪流感病毒血凝素基因原核表达及其在间接ELISA中的初步应用. 陈艳,乔传玲,丁选亚,杨焕良,辛晓光,韩庆功,陈化兰. 2008

[9]H3N2亚型猪流感病毒核蛋白基因的优化表达及抗原性分析. 郭利敏,乔传玲,陈艳,杨焕良,张健,辛晓光,陈化兰. 2010

[10]猪流感病毒新型核糖体移码蛋白PA-X特有序列的原核表达、纯化及鉴定. 宫晓倩,阮宝阳,刘晓敏,张鹏,汪琪,汪秀会,周艳君,李泽君,童武,郑浩,童光志,于海. 2016

[11]抗猪流感病毒单链抗体的原核表达及活性分析. 蒋蔚,刘迎春,陈永军,杨康,王权. 2015

[12]猪流感病毒HA基因原核表达及其初步应用. 陈艳,乔传玲,丁选亚,杨焕良,辛晓光,韩庆功,陈化兰. 2008

[13]猪流感病毒H1N1、H1N2和H3N2亚型多重RT-PCR诊断方法的建立. 杨焕良,乔传玲,陈艳,辛晓光,李一经,陈化兰. 2007

[14]西尼罗病毒NS1与E基因重组腺病毒的构建及免疫原性研究. 刘二战,赵国辉,孙恩成,崔焕忠,杨涛,徐青元,孙晶,孙亮,席娜. 2014

[15]猪细小病毒SY-99株非结构蛋白NS1基因的克隆与原核表达. 吴丹,童光志,仇华吉,薛强,周艳君,李景鹏. 2003

[16]IAV逃避免疫应答的策略. 赵朴,郑玉姝,乔传玲,贾贝贝,刘兴友. 2010

[17]禽流感分离株GD/1/96(H5N1)非结构蛋白结构建模. 郭莹莹,吴春艳,王靖飞. 2010

[18]NS2A序列对日本脑炎病毒NS1基因在原核系统中的体外表达的影响. 仇华吉,金吉东,田志军,周艳君,王云峰,童光志. 2004

[19]鹅细小病毒HN株的分离鉴定及全基因组序列分析. 贺冬梅,谭树义,陈朝喜,叶保国,张艳,林哲敏,曹宗喜. 2016

[20]H5N1亚型禽流感病毒NS1基因在昆虫细胞中的表达. 刘春国,刘明,张云,杨涛. 2006

作者其他论文 更多>>

微信小程序