猪流行性腹泻病毒锁核酸探针荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李艳

作者： 李艳;卞志标;翟少伦;李春玲

作者机构：

关键词： 猪流行性腹泻病毒;M基因;LNA-TaqMan探针荧光定量PCR

期刊名称： 广东畜牧兽医科技

ISSN： 1005-8567

年卷期： 2024 年 002 期

页码： 30-36

摘要： 为建立一种快速、灵敏的猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus, PEDV）早期痕量检测方法，该研究以PEDV的M基因为靶基因，设计了特异性引物和锁核酸（Locked Nucleic Acid,LNA）-TaqMan探针，经过条件优化，建立了基于LNA-TaqMan探针的PEDV荧光定量PCR方法，并与常规TaqMan探针法进行了比对。结果显示，所建立的PEDV的LNA-TaqMan探针荧光定量PCR方法最低检测限为3.2拷贝/微升，较常规TaqMan探针法提高了10倍；与猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒和猪德尔塔冠状病毒等多种病原不存在交叉反应，特异性良好；批内和批间重复性结果的变异系数均小于1%，重复性较好。应用该方法对103份临床样品进行检测，结果显示，共检出PEDV阳性样品47份，阳性率45.63%，与常规TaqMan探针法检测结果的阳性符合率为90.38%。本研究建立的基于LNA-TaqMan探针的荧光定量PCR方法为PEDV的精准检测和流行病学调查提供了一种新的技术选择。

分类号： S858.28

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