副猪嗜血杆菌Wza基因缺失株的构建及生物学特性研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 康磊

作者： 康磊;李军星;王一成;袁秀芳;徐丽华;江军;闵智宇;蒋佳颖

作者机构：

关键词： 自然转化;ΔWza缺失株;荚膜;抗吞噬作用;致病性

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2015 年 23 卷 06 期

页码： 806-815

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPs)荚膜多糖目前被认为是其主要的毒力因子之一,其Wza基因在荚膜多糖的合成运输方面起重要作用。本研究通过构建p UC18-LR-Kan同源重组质粒和运用自然转化法,以Kan抗性的TSA平板成功筛选出Wza基因缺失株(ZJ1208-ΔWza)。生物学特性研究表明,ZJ1208-ΔWza缺失株和ZJ1208野毒株的菌落形态无明显差异,荚膜染色镜检表明在体外培养二者都能形成较薄的荚膜。在体外培养的生长速率方面,二者都在约12 h时其OD600达到最大值,其中ZJ1208-ΔWza缺失株OD600为1.246,而ZJ1208野毒株为2.196,高于ZJ1208-ΔWza株0.95;二者活菌数在约8 h多达到最大,ZJ1208野毒株活菌数对数值为9.763 4,ZJ1208-ΔWza缺失株株约为9.322 2,低于ZJ1208野毒株。菌体形态方面,在培养6 h左右,ZJ1208-ΔWza缺失株菌体大多数可形成长链状或长杆状,而野毒株大多数为较松散,短小的单个菌体。与ZJ1208野毒株比较,ZJ1208-ΔWza株有较快的体外沉降速率,对猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM)的吞噬作用更加敏感,对小鼠毒力明显减弱;以上结果表明,Wza基因的缺失对HPs ZJ1208株的多项生物学特性产生了影响。本研究为进一步研究Wza基因在HPs荚膜形成中的作用提供基础资料。

分类号： S852.61

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