蓝舌病病毒VP2蛋白展示口蹄疫病毒中和表位的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 罗小暖

作者： 罗小暖;王芳;崔玉东;于力

作者机构：

关键词： 蓝舌病病毒;VP2蛋白;O型口蹄疫病毒8E8表位;杆状病毒表达

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2014 年 36 卷 09 期

页码： 731-734

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为在蓝舌病病毒(BTV)VP2蛋白中鉴定展示表达外源B细胞表位的位点,本研究通过同源建模预测VP2蛋白的结构,采用SOE-PCR方法,将O型口蹄疫病毒编码保守的中和表位(8E8)序列分别插入BTV-8 VP2基因编码的两个不同loop区序列中,并分别构建了两种嵌合VP2基因。将嵌合表位编码序列的VP2基因克隆于杆状病毒转移载体pFastBac HTb中,转化感受态细胞DH10Bac,筛选阳性重组杆粒rBacmid-VP2-8E8,转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒rBac-VP2-8E8。经western blot和间接免疫荧光验证,嵌合8E8表位的VP2蛋白在Sf9细胞中正确表达,并且8E8表位能够正确展示在VP2蛋白表面;VP2蛋白三聚体分析表明,嵌合8E8表位的VP2蛋白仍能形成三聚体。以上结果表明,BTV VP2蛋白至少存在两个插入位点,能够容纳12个氨基酸短肽的插入。该结果为BTV病毒样颗粒展示8E8表位的研究提供实验依据。

分类号： S852.65

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