pCB-zeolin-GFP表达载体的构建及瞬时表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张玉

作者： 张玉;白史且;李聪;李达旭;邓永昌

作者机构：

关键词： 绿色荧光蛋白;zeolin基因;载体构建;瞬时表达

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2012 年 28 卷 03 期

页码： 233-239

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为利用荧光蛋白基因GFP检测外源基因在转基因植株中的表达和定位,构建含有GFP基因的植物表达载体pCB-zeolin-GFP。在目的基因的开放阅读框(ORF)两端设计引物,并引入酶切位点和保护碱基,用PCR方法从pDHA扩增得到zeolin基因的全长,克隆到中间载体pMD18-T,分别用NcoⅠ和BglⅡ2种限制性内切酶酶切重组质粒和经过改良的pCAMBIAI1302植物表达载体,经回收、连接、转化、鉴定后,利用基因枪转化法将重组载体转入洋葱表皮细胞,通过共聚焦显微镜检测绿色荧光蛋白在洋葱表皮细胞中的瞬时表达。构建了zeolin基因与绿色荧光蛋白(GFP)融合的植物表达载体pCB-zeolin-GFP,并在洋葱中得到了表达。构建的融合植物表达载体pCB-zeolin-GFP正确,该载体的成功构建为今后进行基因转移、基因功能研究及培育新品种奠定了基础。

分类号： Q943.2

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