miR-665靶向BCL2L11调控武安山羊成肌细胞增殖
文献类型: 中文期刊
第一作者: 冯婧
作者: 冯婧;盛辉;张效生;郭晓飞;姚大为;李玉鹏;陈龙宾;张金龙
作者机构:
关键词: miR-665;BCL2L11;肌肉;武安山羊;成肌细胞
期刊名称: 畜牧兽医学报
ISSN: 0366-6964
年卷期: 2025 年 56 卷 002 期
页码: 582-590
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 旨在利用分子生物学方法探究miR-665靶向调控BCL2L11对山羊成肌细胞增殖的影响。本研究选取1月龄和9月龄的健康山公羊各3只,各年龄段体重均接近且饲养环境相同。本试验通过RT-qPCR分析BCL2L11在武安山羊不同组织中的表达情况;利用RT-qPCR检测了不同月龄武安山羊背最长肌组织中BCL2L11和miRNA-665的表达情况;构建了BCL2L11 3′UTR野生型和突变型载体,以及miR-665 mimics和对照组,将其共转染到HEK293T细胞,通过使用双荧光素酶报告基因检测系统鉴定了miR-665与BCL2L11存在靶向性关系。在山羊成肌细胞转染miR-665 mimic及阴性对照,采用RT-qPCR检测了细胞凋亡标志因子XIAP和Fas表达水平,同时利用EdU试验分析miR-665过表达对山羊成肌细胞增殖的影响。结果表明,BCL2L11在背最长肌组织中高表达;miR-665和BCL2L11在9月龄和1月龄山羊背最长肌组织中表达情况存在差异,miR-665在1月龄的表达量高于9月龄,而BCL2L11则相反,两者存在负调控现象;通过双荧光素酶报告分析显示,当转染过表达miR-665 mimic后,显著抑制了BCL2L11荧光素酶的活性,同时靶基因BCL2L11的mRNA表达水平也明显降低。为进一步验证miR-665的功能,转染miR-665 mimic后发现细胞凋亡标志基因XIAP与Fas的表达量也显著降低;EdU试验分析显示,过表达miR-665后促进了成肌细胞的增殖。综上所述,在山羊背最长肌组织中miR-665作为BCL2L11的调控元件,能够显著抑制山羊成肌细胞中BCL2L11的表达水平,当miR-665过表达后,能够促进成肌细胞的增殖情况。
分类号: S827
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