猪繁殖与呼吸综合征重组病毒非必需基因区的鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 曲泽慧

作者： 曲泽慧;高飞;李丽薇;姜一峰;虞凌雪;周艳君;郑海红;童光志

作者机构：

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;重组病毒;增强性绿色荧光蛋白

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2015 年 37 卷 04 期

页码： 246-249

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)复制的非必需基因区,本研究在高致病性PRRSV细胞致弱株感染性克隆Hu N4-F112的基础上,在其基因组ORF1b和ORF2a之间插入增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,并在外源基因3'端下游插入该病毒的转录调控序列6(TRS6),构建PRRSV-EGFP感染性克隆。将其体外转录制备的病毒全长RNA转染Marc-145细胞后,拯救获得了表达EGFP的重组病毒(r Hu N4-F112-EGFP)。将r Hu N4-F112-EGFP在Marc-145细胞中进行连续传代至20代,其外源gfp基因仍能够持续表达,表明该重组病毒具有良好的遗传稳定性。与亲本病毒Hu N4-F112相比,重组病毒在病毒滴度、空斑形态等方面差异不显著;病毒生长曲线的结果显示,重组病毒具有良好的增殖能力。本研究结果表明,在PRRSV的ORF1b和ORF2a基因区中插入外源基因并未影响该病毒体外复制,该非必需基因区的鉴定为进一步研究以PRRSV疫苗为活病毒载体多价重组疫苗的研发奠定基础。

分类号： S852.65

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