巴西橡胶树胶乳酵母双杂交cDNA表达文库的构建及分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 杨子平
作者: 杨子平;李辉亮;郭冬;彭世清
作者机构:
关键词: 橡胶树;酵母双杂交;cDNA文库
期刊名称: 热带生物学报
ISSN: 1674-7054
年卷期: 2013 年 4 卷 04 期
页码: 303-307
摘要: 提取巴西橡胶树胶乳总RNA,并纯化mRNA。采用特异引物(oligo-dT)反转出第一链DNA,经LDPCR合成第二链DNA。将ds cDNA和经SmaⅠ线性化的pGADT7-Rec质粒共转化Y187酵母菌,构建酵母双杂交cDNA表达文库。结果表明,转化单菌落个数为2.8×107;文库滴度为4.92×107·mL-1;插入片段大小主要分布于500~2 000 bp间;重组率为96%。实验数据表明该文库能满足后续的杂交筛选。
分类号: Q782
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