毕赤氏酵母/hGM-CSF工程菌的构建及表达分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨国峰

作者： 杨国峰;周鹏;张泰芳

作者机构：

关键词： hGM-CSF;毕赤氏酵母;载体构建;表达分析

期刊名称： 药物生物技术

ISSN： 1005-8915

年卷期： 2003 年 06 期

页码： 349-352

收录情况： CSCD

摘要： 为了探索利用毕赤氏酵母系统表达和生产人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,hGM-CSF)的可行性,使用经改造的hGM-CSF基因构建pGAPZa-A/hGM-CSF分泌型表达载体,转入毕赤氏酵母SMD1168(his 4,pep 4)菌株和GS115(his 4)菌株,利用斑点杂交技术筛选hGM-CSF基因阳性菌株,利用SDS-PAGE和TF-1依赖细胞株/MTT比色法对工程菌株的分泌产物进行表达和生物活性分析,最后筛选得到7个hGM-CSF基因阳性菌株,其中有3个工程菌株的杂蛋白较少且主带蛋白质相对分子质量与经改造的hGM-CSF基因相对分子质量保持一致,这3个工程菌株的分泌蛋白质样品都具有天然hGM-CSF的生物活性,经初步提取,活性单位分别为2.28×105U/ml、2.22×105U/ml和2.46 × 105U/ml。从而证明利用毕赤氏酵母系统表达hGM-CSF是可行的,为hGM-CSF的生产和临床应用打下了基础。

分类号： Q786

  • 相关文献

[1]高羊茅FaCONSTANS基因的表达及功能分析. 陈锡,陈莹,刘晓霞,舒健虹,王小利,赵德刚. 2021

[2]陆地棉环核苷酸离子通道蛋白基因GhCNGC8克隆及初步表达分析. 赵准,胡文冉,邵武奎,黄全生. 2024

[3]球孢白僵菌硝酸还原酶基因同源重组载体的构建. 赵曦,张正坤,孙召朋,徐文静,杜茜,隋丽,李启云. 2010

[4]GFP与微管结合蛋白和肌动蛋白结合区融合蛋白载体构建与表达. 胡建广,尹艳. 2004

[5]马铃薯Y病毒CP基因RNAi载体构建与干涉效果测定. 李奇科,陶刚,邱又彬,邱礽,迟胜起,朱英,刘作易. 2009

[6]AtWRKY26转录因子克隆及植物表达载体的构建. 伍林涛,杜才富,曾章丽,张敏琴,韩宏仕. 2014

[7]四价抗马铃薯病毒植物表达载体构建及其对烟草的转化. 陈晓艳,孟亚雄,贾小霞,张武,刘石,郭玉美,齐恩芳. 2017

[8]猪瘟病毒表面抗原E2基因植物表达载体的构建. 祁喜涛,李国强,赵文亮,樊福好,李余良,胡建广. 2007

[9]PRK基因原核表达质粒的构建. 龚元亚,代其林,田霞,孙英坤,谢琳,杨娟,王劲. 2011

[10]一种载体构建的新方法:重组融合PCR法. 李玉,严红,马立新. 2012

[11]木薯AGPase基因的克隆与载体构建. 罗兴录,唐娟娟,许娟,袁胜勇,杨鑫. 2012

[12]玉米淀粉合成酶SSⅡa启动子的克隆及功能分析. 陈展宇,王阔,王晓梅,刘相国,崔喜艳. 2017

[13]线虫Fat-1基因密码子的优化及其真核表达载体构建. 张立春,刘晓辉,曹阳,于永生,朴庆林,金海国,王晓阳. 2012

[14]猪TPST1基因的克隆、序列分析及真核表达载体的构建. 别墅,孙洪涛,张冬杰,汪亮,刘娣. 2011

[15]根结线虫16D10基因与花生FAD2基因RNAi载体构建. 于洪涛,唐月异,王秀贞,李贵杰,王传堂. 2011

[16]红麻6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PDGH)基因克隆及RNAi载体构建. 赵艳红,明庭会,余明丽,冉珊敏,钱景华,周瑞阳,陈鹏. 2014

[17]甘薯淀粉合成关键酶AGPase小亚基双顺反子共表达载体构建. 唐维,李强,张允刚,后猛,闫会,刘亚菊,王欣,马代夫. 2019

[18]花生NADH脱氢酶1亚基10B-like基因克隆表达分析及载体构建. 曹广英,唐月异,王秀贞,孙全喜,王志伟,吴昌湛,陈剑洪,王传堂. 2018

[19]转录调控基因GmLEC1的cDNA克隆及其植物表达载体的构建. 朱红林,沙爱华,符秀梅,李小靖,陈银华,单志慧,邱德珍,周新安. 2009

[20]花生CAX相互作用蛋白4(CXIP4)基因克隆表达分析及载体构建. 吴琪,曹广英,唐月异,王秀贞,孙全喜,王志伟,陈剑洪,姜启双,王传堂. 2017

作者其他论文 更多>>

微信小程序