绵羊生殖道抗菌肽cDNA克隆及真核表达载体构建
文献类型: 中文期刊
第一作者: 库朝锋
作者: 库朝锋;王新华;薄新文;张慧;吕廷德;李娜
作者机构:
关键词: 绵羊生殖道;抗菌肽;cDNA克隆;表达载体
期刊名称: 中国畜牧兽医
ISSN: 1671-7236
年卷期: 2009 年 36 卷 06 期
页码: 70-73
收录情况: 北大核心
摘要: 绵羊生殖道抗菌肽(ORTAP40)是从中国美利奴绵羊生殖道分离的一种新型的阳离子抗菌肽,在绵羊发育早期的防御中起到了主要的作用。在本研究中,根据ORTAP40 N端氨基酸序列设计引物,利用3′RACE技术克隆了绵羊生殖道抗菌肽3′末端全长cDNA序列,并被GenBank收录,登录号为FJ514476,经过cDNA序列分析显示,ORTAP40是一个4.8 ku的小肽,与先期分离纯化的分子质量一致。作者随后参照巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子偏好性,设计并人工合成了OR-TAP40成熟肽目的基因片段,所合成的ORTAP40基因全长120 bp,通过基因重组的方法将目的基因克隆到pPIC3.5K和pPICZαA表达载体上,成功构建了重组酵母胞内表达载体pPIC3.5K-ORTAP40和外泌表达载体pPICZαA-ORTAP40,为抗菌肽的开发和应用奠定了基础。
分类号: S826
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