烟草中TMV,CMV和PVY多重RT-PCR检测体系的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨金广

作者： 杨金广;张帅;申莉莉;钱玉梅;陈德鑫;王长栓;黄瑾;王凤龙

作者机构：

关键词： 烟草;多重RT-PCR;病毒检测;应用

期刊名称： 中国烟草学报

ISSN： 1004-5708

年卷期： 2010 年 16 卷 4 期

页码： 83-88

收录情况： CSCD

摘要： 利用DNAMAN软件对GenBank数据库中已登录的烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV),黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaicvirus,CMV)和马铃薯Y病毒(Potato virus Y, PVY)全基因组序列进行序列比对,选择最保守的区域,进行相应病毒的引物设计,建立了多重RT-PCR检测烟草中TMV,CMV和PVY的技术体系.对3条扩增片段进行回收,测序和BLAST比较,结果表明多重RT-PCR所扩增的片段序列均与预期设计序列相符,同源性均在98%以上.利用多重RT-PCR对广西区132个烟草病毒病样品进行检测分析,结果表明TMV检出率为91.7%,CMV检出率为18.2%,PVY检出率为55.3%.较单一的RT-PCR,具有简便,快速和经济的特点.与酶联免疫吸附法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)相比,其检测限度高出ELISA的检测限度104级数,具有更高的特异性与准确性.该方法可以同步快速,特异地检测出烟草中TMV,CMV和PVY病毒的侵染

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