表达H5亚型禽流感同义(Consensus)HA蛋白的重组质粒构建及体外表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 常晓飞

作者： 常晓飞;赵双成;田石;柳金雄;王靖飞;曾显营;胡永浩;姜永萍;陈化兰

作者机构：

关键词： H5亚型禽流感病毒;同义HA基因;表达

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2012 年 34 卷 07 期

页码： 510-513

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究禽流感病毒(AIV)H5亚型同义Consensus HA(Cons-HA5)基因的重组表达质粒在体外的表达情况,本研究通过对从NCBI流感数据库中获得的5000条H5亚型AIV的HA蛋白的序列比对、分析获得一条同义HA蛋白,将其相对应的核苷酸序列进行鸡体偏嗜性密码子优化,人工合成Cons-HA5基因并克隆于真核表达载体pCAGGS中构建重组表达质粒pCACons-HA5。将重组质粒转染293-T细胞,在激光共聚焦显微镜下观察转染后不同时间HA蛋白的表达情况,同时在转染后24 h、48 h后分别进行表达蛋白的western blot检测。结果表明,pCACons-HA5转染293-T细胞后,其表达的HA蛋白先分布于细胞质中,而后转移至细胞膜表面;westernblot鉴定结果表明,Cons-HA5重组蛋白可以与AIV多克隆血清反应分子量约为70 ku。该重组质粒的构建将为进一步Cons-HA5核酸免疫对H5亚型不同抗原群AIV的交叉保护免疫效力研究奠定基础。

分类号： S852.65

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