大草蛉 Chrysopa pallens (Rambur)触角 cDNA 文库的构建

文献类型: 中文期刊

第一作者: 王娟

作者: 张礼生;张海平;刘晨曦;王孟卿;陈红印

作者机构:

关键词: 大草蛉;触角;嗅觉;cDNA 文库

期刊名称: 环境昆虫学报

ISSN: 1674-0858

年卷期: 2014 年 36 卷 6 期

页码: 898-904

收录情况: 北大核心

摘要: 本文以羽化3天内的大草蛉 Chrysopa pallens(Rambur)雌雄触角为材料提取总 RNA,以此为模板,通过SMARTscribe~(TM) Reverse Transcriptase 反转录酶反转录合成第一链 cDNA,引物扩增获得双链 cDNA,经 CHROMA SPIN + TE - 1000 Column 分级分离后,收集0. 4 - 2. 0 kb 之间的片段重组于质粒载体 pSMART2IFD 并电转化至大肠杆菌 Escherichia coli DH5ɑ,最终构建获得大草蛉雌雄触角全长 cDNA 文库。结果显示构建的雌雄触角 cDNA 初级文库滴度分别2. 1 × 10~6 pfu / mL和1. 8 × 10~6 pfu / mL,重组率均达到93. 0% 以上,插入cDNA的片段大小范围为0. 4 - 2. 0 kb,主要集中在0. 5 - 1. 0 kb,平均长度为549. 0 bp,表明构建获得的文库质量较高,可保证大规模全长 cDNA的获得。该文库的构建丰富了大草蛉基因序列信息,为大量克隆大草蛉嗅觉相关基因,深入揭示大草蛉嗅觉识别机制奠定基础,也为合理利用大草蛉进行生物防治提供理论依据。

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