“睡美人”转座子系统介导EGFP转染鸡SSCs条件优化的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李碧春

作者： 李碧春;陈强;高波;田智泉;余飞;何先红;宋成义;常国斌;王克华

作者机构：

关键词： 转座子;电穿孔;精原干细胞;增强型绿色荧光蛋白

期刊名称： 中国家禽

ISSN： 1004-6364

年卷期： 2009 年 31 卷 01 期

页码： 10-14

收录情况： 北大核心

摘要： 利用"睡美人"转座子系统介导增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)报告基因,比较和优化了电穿孔转染条件和精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)对G418的耐受能力。结果表明,在SB与PT-EGFP的比为1∶10,质粒浓度为15μg/mL,细胞处于对数生长期,且细胞密度为106～107/mL时,精原干细胞在电场强度为270V,脉冲时程为80μs,转染后在4℃静置10min的条件下转染效率最高。浓度为400μg/mL的G418对转染后的SSCs进行快速筛选6d时,出现了EGFP阳性克隆。

分类号： S831

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