口蹄疫病毒VP1蛋白病毒样颗粒表达系统的构建

文献类型: 中文期刊

第一作者: 窦小龙

作者: 窦小龙;任晓冰;魏婕;苗书魁;冉多良;马文戈

作者机构:

关键词: Asia 1型口蹄疫病毒;病毒样颗粒;融合蛋白;枯草芽胞杆菌

期刊名称: 动物医学进展

ISSN: 1007-5038

年卷期: 2014 年 03 期

页码: 11-14

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为制备Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)双层结构病毒样颗粒,选择牛病毒性腹泻病毒(BVDV)流行株BVDV JZ05-1核心蛋白p14的第169~270位氨基酸和FMDV Asia 1/JS/CHA/05结构蛋白VP1的第1~211位氨基酸,两者之间设计柔性肽连接,人工合成p14-柔性肽-VP1融合蛋白编码序列,全基因长990bp。合成基因与枯草芽胞杆菌表达载体p7257-P43连接,构建成表达质粒p7257-P43-P14-VP1。转化枯草芽胞杆菌WB800,经筛选、鉴定,获得表达p14-VP1融合蛋白的枯草芽胞杆菌。该重组表达菌在含有40μg/mL氯霉素的LB中培养后,菌体超声破碎可检测到目的蛋白。Western blot结果显示,该蛋白能特异性识别Asia 1型FMDV抗体,具有良好的反应原性。电镜观察显示,融合蛋白组装为直径约50nm大小的病毒样颗粒(VLP)。

分类号: Q789

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