电击法玉米转基因技术

文献类型: 中文期刊

第一作者: 曹靖生

作者: 曹靖生

作者机构:

关键词: 玉米;转基因;电击法;原生质体;转化

期刊名称: 玉米科学

ISSN: 1005-0906

年卷期: 1999 年 7 卷 02 期

页码:

摘要: 本文介绍了电击法转化玉米原生质体的原理、方法及转基因玉米鉴定的方法等。在离体条件下,将欲转入的靶基因与载体质粒重组构建重组DNA分子,同时,用去壁液处理玉米未成熟胚的悬浮细胞制备原生质体。将20~40μg的超螺旋重组DNA分子与15~3×106个玉米原生质体细胞混匀后,置于强电场环境中,用500~750V/cm的高电压处理5min,使原生质体的细胞膜通透性增强,并使重组分子进入到受体细胞内。在选择培养基中,选择已转入并稳定表达外源基因的转化细胞,再经组织培养形成愈伤组织,并再生成转基因玉米植株,最后用适当的方法对再生植株进行鉴定。

分类号: S513.035.2

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