文献类型: 中文期刊
第一作者: 孟庆美
作者: 孟庆美;王少辉;韩先干;韩月;丁铲;戴建君;于圣青
作者机构:
关键词: 禽致病性大肠杆菌;毒力基因;多重PCR;检测
期刊名称: 微生物学报
ISSN: 0001-6209
年卷期: 2014 年 54 卷 06 期
页码: 696-702
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 【目的】建立禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)黏附相关基因、侵袭及毒素相关基因、抗血清存活相关基因及铁转运相关基因的多重PCR方法,实现禽致病性大肠杆菌毒力基因的简便、快速检测。【方法】根据GenBank公布的基因序列,设计合成18对特异性引物,通过条件优化,建立四组多重PCR体系,并通过模板倍比稀释检测各组多重PCR的灵敏性。利用多重PCR检测100株APEC毒力基因的分布,验证多重PCR方法的可行性。【结果】根据PCR扩增片段大小判定,上述四组多重PCR体系均能同时扩增出该组中的各个毒力基因,且灵敏度分别为:103CFU、103CFU、105CFU、105CFU细菌和1ng、1ng、10ng、10ng DNA。100株APEC的毒力因子检测结果显示,多重PCR和单基因PCR结果一致。【结论】建立的四组多重PCR方法能够简便、快速地检测禽致病性大肠杆菌的毒力基因,可用于毒力基因的鉴定以及流行病学调查。
分类号: S852.61
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