黄瓜花叶病毒香蕉分离物基因组全长克隆及侵染性克隆构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 瞿青云

作者： 瞿青云;沈文涛;庹德财;言普;陈萍;周鹏

作者机构：

关键词： 香蕉;黄瓜花叶病毒;进化树分析;侵染性克隆

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2024 年 22 卷 001 期

页码： 97-107

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 香蕉(Musa spp.)是重要的热带经济作物.为了解黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)对香蕉的侵染机制进而有针对性地进行防控,本研究从染病的香蕉样本中提取得到黄瓜花叶病毒(CMV-Ban),并对其三分体基因组RNA进行全长克隆和序列分析.其中,CMV-BanRNA1全长为3 375 bp,编码1a蛋白;CMV-Ban RNA2全长为3 043 bp,编码2a和2b蛋白;CMV-Ban RNA3全长为2 218 bp,编码3a运动蛋白和外壳(CP)蛋白.通过BLAST对比,CMV-Ban RNA1的核苷酸序列与马来西亚黄瓜分离株CLW2 RNA1的同源性最高(92.1%),CMV-Ban RNA2的核苷酸序列与意大利辣椒分离株(Vir)的同源性最高(91.8%),CMV-Ban RNA3与国内报道的油菜分离株YNRNA3同源性最高(94.5%).通过VectorNTI Advance 11.5对比,CMV-Ban与台湾香蕉分离株20氨基酸序列同源性可达99.9%.通过进化树分析可知,从感染了黄瓜花叶病毒的海南香蕉上分离出来的分离物CMV-Ban属于亚组IB.采用In-Fushion无缝克隆将CMV-Ban三分体基因组RNA分别插入植物表达载体pCass4-RZ,成功构建侵染性载体RC-CMV-Ban1、RC-CMV-Ban2、RC-CMV-Ban3,并通过农杆菌渗透注射技术侵染本生烟(Nicotiana benthamiana),21 d后叶片呈现明显的花叶斑驳症状,说明侵染性克隆RC-CMV-Ban成功侵染本生烟.研究结果为后续解析CMV-Ban对香蕉的侵染机制与防治提供科学依据.

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