牛呼吸道合胞体病毒G蛋白的截短表达与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 冯军科

作者： 冯军科;薛飞;李娇;祖立闯;朱远茂;任宪刚

作者机构：

关键词： 牛呼吸道合胞体病毒;G基因;克隆;表达

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN： 1671-8135

年卷期： 2008 年 28 卷 12 期

页码： 24-29

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 将牛呼吸道合胞体病毒(bovine respiratory syncytial virus,BRSV)G基因截短成2个片段G1和G2,然后以人工合成的牛呼吸道合胞体病毒G基因为模板,利用PCR分别扩增G1和G2基因片段,其大小分别为570 bp和308 bp。将目的片段定向克隆到pET30a表达载体,酶切及测序鉴定均正确后,转化BL21表达菌,经IPTG诱导后G1和G2基因片段均获得了表达,且为可溶性表达。利用Ni柱亲和层析法在非变性条件下纯化重组蛋白,经免疫印迹试验鉴定证明纯化的重组蛋白G1具有良好的抗原性和特异性,而重组蛋白G2无反应性。应用纯化的重组蛋白G1进行的间接ELISA与免疫印迹试验在国内牛血清中检测到了BRSV血清抗体。对建立BRSVG蛋白的血清学诊断方法和为开展BRSVG蛋白生物学功能的研究奠定了基础。

分类号： S858.23

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