柑橘衰退病毒RT-RPA-LFD可视化检测方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 申世凯

作者： 申世凯;曾婷;乔兴华;陈力;任杰群;周彦

作者机构：

关键词： 柑橘;柑橘衰退病毒;反转录-重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条;快速检测

期刊名称： 果树学报

ISSN：

年卷期： 2023 年 012 期

页码： 2652-2660

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】柑橘衰退病由柑橘衰退病毒（citrus tristeza virus,CTV）引起，是一种世界性的重要柑橘病害。为实现CTV的田间快速检测，建立一种准确、快速且可视化的检测方法。【方法】以CTV外壳蛋白（CP）的保守区域为靶标，设计3对特异性引物和探针，通过引物筛选，以及优化引物浓度、反应时间和反应温度等条件，建立CTV的反转录-重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条（RT-RPA-LFD）快速检测方法，明确其灵敏度，并用于田间疑似样品的检测。【结果】建立了CTV的RT-RPA-LFD检测方法：最佳检测引物为RPA-1F/R，对应探针为RPA-P，最佳反应条件为40℃，25 min，且与其他5种柑橘病毒无交叉反应。该方法的灵敏度是RT-PCR的100倍，最低可检测到2.12×101拷贝·μL-1的CTV核酸，与RT-qPCR相当。采用RT-RPA-LFD法在67份田间样品中检测出CTV阳性样品41份，与RT-PCR法检测结果一致。【结论】建立的CTV RT-RPA-LFD法具有操作简单、快速、结果可视等优点，适合基层植保工作者对田间样品开展快速检测。

分类号： S436.66

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